خاموشی موقت و دائم ژن کدئینون رداکتاز (codeinone reductase) و تحلیل گیاهان تراریخت شقایق(papaver somniferum l. )

thesis
abstract

یکی از مهم ترین گیاهان دارویی شقایق ((papaver somniferum l. می باشد. اهمیت دارویی این گونه مربوط به قابلیت تولید و ساخت گروهی از آلکالوئیدهای بنزوفنانتریدین از زیر گروه آلکالوئیدهای بنزیل ایزوکوئینولین (شامل تبائین، کدئین، پاپاورین، مورفین و مشتقات نیمه مصنوعی) می باشد که کاربرد وسیعی در صنعت داروسازی و پزشکی دارد. مهندسی متابولیک گیاهی رشته نسبتاً جدیدی از تحقیقات است که فرصت های تازه ای را برای پیشرفت متابولیک های گیاهی، سلولی و فرآیندهای فیزیولوژیکی ایجاد می کند. در طول مسیر ساخت مورفین، آنزیم مرحله نهایی دو واکنش متناوب بین ساخت مورفین و تبائین، کدئینون رداکتاز (cor) است. برای شناخت عملکرد ژن، روشی منتخب برای خاموشی سریع ژن-های گیاهی خاموش سازی القایی با ویروس (virus induced gene silencing) می باشد. vigs براساس پدیده تداخلrna یا rna-interference (rnai) است که به واسطه rna های کوچک در بیان ژن تداخل ایجاد می کند. در گیاهانی که با ویروس آلوده می شوند rna ویروسی چرخه ای در میزبان ایجاد می کند که موجب خاموشی ژن در مقابل ویروس می گردد. هدف از انجام این تحقیق بررسی خاموشی موقت و دائم ژن کدئینون رداکتاز (codeinone reductase) و تحلیل گیاهان تراریخت شقایق بود. برای رسیدن به این هدف سازه خاموشی موقت با استفاده از ناقل ptrv ساخته شد و نتایج همسانه سازی این ژن با استفاده از روش های مختلف مولکولی، pcr و هضم آنزیمی تأیید گردید. سازه پس از انتقال به آگروباکتری تومی فشینس به گیاه منتقل شد. برای تعیین سطوح نسخه برداری ژن هدف ازpcr در زمان واقعی و به منظور بررسی آلکالوئیدها نیز از آنالیز hplc استفاده شد. برای بررسی خاموشی دائم نیز از سازه خاموشی بخشی از ژن در ناقل pgsa1285 استفاده گردید و ریز نمونه های گیاه با آگروباکتری حاوی این ناقل، تراریخت شدند. جهت بهینه سازی انتقال ژن آزمایش هایی با فاکتورهای مورد مطالعه، شامل دو فاکتور محیط (b5 و ms)، دو فاکتور آنتی بیوتیک (کانامایسین و پرومومایسین) در سطوح 5، 15، 25 و 35 میلی گرم بر لیتر انجام شد. نتایج با آزمون دانکن و نرم افزار mstat-c مورد مقایسه میانگین قرار گرفتند. برای اثبات تراریختگی پس از باززایی گیاهچه های شقایق آزمایش pcr برای ژن nptii (ژن مقاومت به کانامایسین) طراحی و اجرا شد که نتایج pcr تراریختگی را در گیاهان انتخابی اثبات کرد. واژگان کلیدی: بنزیل ایزوکوئینولین، آگروباکتری، خاموشی ژن، کدئین، vigs

similar resources

طراحی و ساخت سازه خاموشی ژن کدئینون ردوکتاز(codeinone reductase) با تکنیک rnai و انتقال آن به گیاه داروییpapaver somniferum l.

هزاران سال است که از گیاهان به عنوان منشأ دارو استفاده می شود. سازمان بهداشت جهانی تخمین زده است که امروزه بیش از 80 درصد مردم جهان هنوز از داروهای گیاهی برای درمان بیماری-ها استفاده می کنند. متابولیت های ثانویه از جمله اقتصادی ترین مواد در فرآیند تولید دارو، مواد معطر، رنگدانه ها، افزودنی های غذایی و آفت کش ها هستند. هر ساله تکنیک های متفاوتی برای افزایش بیومولکول ها در گیاهان دارویی به وجود م...

افزایش بیان دائم ژن کدئینون ردوکتاز در گیاه تراریخت شقایق الی‌فرا (Papaver somniferom L.)

امروزه گیاه Papaver somniferom L. به‌عنوان منبع تجاری آلکالوئیدهای ارزشمند مورفین و کدئین محسوب می‌شود. آنزیم کدئینون ردوکتاز (Codeinone reductase) با قابلیت تبدیل کدئینون به کدئین و مورفینون به مورفین از آنزیم‌های کلیدی جهت مهندسی متابولیک مسیر بیوسنتز این ترکیب‌ها محسوب می‌شود. در این تحقیق ابتدا بهینه‌سازی انتقال ژن از طریق Agrobacterium tumefaciens دارای پلاسمید pBI121 (حاوی ژن گزارشگر gus)...

full text

جداسازی، همسانه سازی و خاموشی موقت ژن BBE1 با استفاده از تکنیک خاموشی ژن القا شده توسط ویروس (VIGS) در ژنوتیپ ایرانی گیاه شقایق .Papaver somniferum L

گیاه دارویی شقایق (Papaver somniferum L.) یکی از قدیمی ترین گیاهان دارویی جهان است و به عنوان تنها منبع تجاری برای تولید مسکن‌های مهم دارویی و مشتقات نیمه سنتزی مانند اکسی کدون و نالترکسون مطرح است. چندین آلکالوئید بنزیل ایزوکوئینولینی دیگر با ویژگی‌های بالقوه دارویی از جمله پاپاورین، نوسکاپین و سانگوینارین نیز توسط این گیاه تولید می‌شود. ژن BBE1 یکی از ژن‌های کلیدی در بیوسنتز آلکالوئیدهای بنزی...

full text

خاموش کردن بیان ژن کدئین رداکتاز به‏روش خاموش‌سازی القایی با ویروس در گیاه دارویی شقایق (Papaver somniferum L.)

هدف: گیاه دارویی شقایق (Papaver somniferum L.) تنها منبع تجاری از آلکالوئیدهای دارویی بنزوفنانترین از زیر گروه آلکالوئیدهای بنزیل ایزوکوئینولین  است که  شامل مسکن­های ضد درد مانند کدئین و داروهای نیمه مصنوعی اکسی کدون، باپرنورفین و نالتروکسون می­باشد. اگرچه بیشتر ژن­های مسیر این آلکالوئیدها شناسایی شده­اند، ولی تنظیم پس از نسخه­برداری ژن­های مسیر آلکالوئیدهای آن‏ها به­...

full text

افزایش بیان دائم ژن کدئینون ردوکتاز در گیاه تراریخت شقایق الی فرا (papaver somniferom l.)

امروزه گیاه papaver somniferom l. به عنوان منبع تجاری آلکالوئیدهای ارزشمند مورفین و کدئین محسوب می شود. آنزیم کدئینون ردوکتاز (codeinone reductase) با قابلیت تبدیل کدئینون به کدئین و مورفینون به مورفین از آنزیم های کلیدی جهت مهندسی متابولیک مسیر بیوسنتز این ترکیب ها محسوب می شود. در این تحقیق ابتدا بهینه سازی انتقال ژن از طریق agrobacterium tumefaciens دارای پلاسمید pbi121 (حاوی ژن گزارشگر gus)...

full text

خاموشی سیستمیک ژن کدکننده آنزیم تبائین -6- اُ- دمتیلاز در گیاه دارویی خشخاش (Papaver somniferum L.) با استفاده از فن خاموشی ژن با القا ویروس

گیاه دارویی خشخاش (Papaver somniferum L.) به‎عنوان یکی از مهمترین منابع تجاری برای برخی از آلکالوئیدهای دارویی مانند ضد درد کدئین و مورفین و داروهای نیمه مصنوعی مانند اکسی­کدون، بوپرونورفین و نالتروکسن میباشد. از ژنهای پائین‌دست مسیر بیوسنتزی آلکالوئیدها در این گیاه، ژن تبائین -6- اُ- دمتیلاز (T6ODM) است که بر تولید موادی مانند تبائین و اوریپاوین تأثیرگذار است. در این پژوهش، اثر سازه خاموشی متکی...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه لرستان - دانشکده کشاورزی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023